Мутации в генах KIT, GNAQ, BRAFn RASy больных увеальной меланомой

Увеальная меланома (УМ) - одна из наиболее частых внутриглазных опухолей. Онкогены BRAF и NRAS - частые нарушения в меланомах кожи, однако они редко встречаются в увеальных меланомах. Напротив, мутации в онкогенах К1Ти GNAQ, выявленные в увеальных меланомах, крайне редко встречаются в меланомах кожи. Ген GNAQ кодирует альфа-субъединицу гетеротримерного G-белка с активностью ГТФазы. Мутации GNAQ лишают ГТФазу способности гидролизовать ГТФ, что приводит к ее активации и передаче сигнала на МАРК-киназный каскад. Генетический анализ УМ необходим для применения специфической молекулярно-направленной (таргетной) терапиии для лечения пациентов с метастатическими УМ. Применение иматиниб мезилата рекомендуется при наличии мутаций гена KIT, вемурофениба - при наличии мутации BRAF (V600E). Цель работы. Поиск и определение типа мутаций онкогенов BRAF, NRAS, KRAS, К1Т и GNAQ в УМ. ДНК выделяли из ткани опухолей, полученных интраоперационно от 17 пациентов с УМ. Все опухоли гистологически верифицированы. Для выявления мутаций из опухоли выделяли ДНК, амплифицировали в реакции ПЦР с праймерами к областям генов с максимальной частотой мутаций: BRAF (экзон 15), NRAS (экзон 2), KIT (экзон 11), GNAQ (экзон 5), KRAS (экзон 2). После очистки продукт ПЦР подвергали прямому секвенированию. Мутации онкогенов BRAF, NRAS не были обнаружены. В 12% (2/17) случаев обнаружены делении в 11 экзоне гена KIT. Мутации гена GNAQ в экзоне 5, соответствующие заменам Q209P and Q209L в белке GNAQ, обнаружены в 41% (7/17) случаев УМ. Впервые исследованы мутации увеальных меланом у российских пациентов

увеальные меланомы, мутации

1. Анурова О.А., Лихванцева В.Г., Верещагина М.В. Изучение роли экспрессии трансмембранного рецептора CD117/c-kit в прогрессировании увеальных меланом. Вестник офтальмологии. 2007, т. 123, № 5, с. 41-44.

2. Беляков И.С., Анурова О.А., Снигур П.В. и соавт. Мутации KIT и клинико-морфологические особенности стромальных опухолей желудочно-кишечного тракта. Вопр. Онкол. 2007, т. 53, № 6, с. 667-681.

3. Возный Э.К., Белоногов А.В. Меланома некожных локализаций. Практическая Онкология. 2001, т. 8, № 4, с. 65-68

4. Когония Л.М., Лихванцева В.Г., Анурова О.А. и соавт. Диагностика и факторы риска развития меланомы. М., РОССПЭН. 2009, с. 130-135.

5. Мазуренко Н.Н., Беляков И.С., Цыганова И.В. и соавт. Значение молекулярно-генетических маркеров для прогноза и лечения стромальных опухолей ЖКТ В кн.: «Достижения и перспективы лекарственного лечения злокачественных опухолей. 2011 год. Этюды химиотерапии III». Под редакцией В.А. Горбуновой. М., Фаргус Принт Медиа. 2011, с. 111-126.

6. Fecher L.A., Cummings S.D., Keefe M.J. et al. Toward a Molecular Classification of Melanoma. Journal of Clinical Oncology. 2007, v. 25, No. 12, p. 1606-1620.

7. Beadling C., Jacobson-Dunlop E., Hodi F.S. et al. KIT gene mutations and copy number in melanoma subtypes. Clin. Cancer Res. 2008, v. 14, No. 21, p. 6821-6828.

8. Cardenas-Navia L.I., Cruz P., Lin J.С. et al. Novel somatic mutations in heterotrimeric G proteins in melanoma. Cancer Biol. Ther. 2010, v. 4, No. 1, p. 33-37.

9. Carvajal R.D., Antonescu C.R., Wolchok J.D. et al. KIT as a therapeutic target in metastatic melanoma. JAMA. 2011, v. 305, No. 8, p. 2327-2334.

10. Corless C.L., Fletcher J.A., Heinrich M.C. Biology of gastrointestinal stromal tumors. J. Clin. Oncol. 2004, v. 22, No. 18, p. 3813-3825.

11. Kitamura Y., Hirota S., Nishida T. Gastrointestinal stromal tumors (GIST): a model for molecule-based diagnosis and treatment of solid tumors. Cancer Sci. 2003, v. 94, No. 4, p. 315-320.

12. Küsters-Vandevelde H.V., Klaasen A., Küsters B. et al. Activating mutations of the GNAQ gene: a frequent event in primary melanocytic neoplasms of the central nervous system. Acta Neuropathol. 2010, v. 119, No. 6, p. 317-323.

13. Maat W., Kilic E., Luyten G.P. et al. Pyrophosphorolysis detects B-RAF mutations in primary uveal melanoma. Invest Ophthalmol. Vis. Sci. 2008, v. 49, No. 1, p. 23-27.

14. Matsuse M., Mitsutake N., Nishihara E. et al. Lack of GNAQ hotspot mutation in papillary thyroid carcinomas Thyroid. 2009, v. 19, No. 8, p. 921.

15. Oyesiku N.M., Evans C.O., Brown M.R. et al. Pituitary adenomas: screening for G-alpha-q mutations. J. Clin. Endocr. Metab. 1997, v. 82, No. 12, p. 4184-4188.

16. Papastefanou V.P., Cohen V.L. Uveal Melanoma. Journal of Skin Cancer. 2011, v. 2011, p. 1-13.

17. Ribas A., Flaherty K.T. BRAF targeted therapy changes the treatment paradigm in melanoma. Nat. Rev. Clin. Oncol. 2011, v. 8, No. 7, p. 426-433.

18. Satzger I., Schaefer T., Kuettler U. et al. Analysis of c-KIT expression and KIT gene mutation in human mucosal melanomas. Br. J. Cancer. 2008, v. 99, No. 12, p. 2065.

19. Schmidt-Pokrzywniak A., Jockel К.Н., Bornfeld N. et al. Positive interaction between light iris color and ultraviolet radiation in relation to the risk of uveal melanoma: a case-control study. Ophthalmology. 2009, v. 116, No. 2, p. 340-348.

20. Singh M., Lin J., Hocker T.L. etal. Genetics of melanoma tumorigenesis. Br. J. Dermatol. 2008, v. 158, No. 1, p. 15-21.

21. Torres-Cabala C.A, Wang W.L, Trent J. et al. Correlation between KIT expression and KIT mutation in melanoma: a study of 173 cases with emphasis on the acral-lentiginous/mucosal type. Mod. Pathol. 2009, v. 22, No. 11, p. 1446-1456.

22. Virgili G., Gatta G., Ciccolalloetal L. Incidence of uveal melanoma in Europe. Ophthalmology. 2007, v. 114, No. 12, p. 2309-2315.

23. Van Raamsdonk C.D., Bezrookove V., Green G. et al. Frequent somatic mutations of GNAQ in uveal melanoma and blue naevi. Nature. 2009, v. 457, No. 7229, p. 599-602.

24. Van Raamsdonk C.D., Fitch K.R., Fuchs H. et al. Effects of G-protein mutations on skin color. Nature Genet. 2004, v. 36, No. 9, p. 961-968.

25. Wallander M.L., Layfield L.J., Emerson L.L. et al. KIT mutations in ocular melanoma: frequency and anatomic distribution. Mod. Pathol. 2011, v. 24, No. 8, p. 1031-1035.

26. Willmore-Payne C., Holden J.A., Hirschowitz S. et al. BRAF and c-kit gene copy number in mutation-positive malignant melanoma. Hum. Pathol. 2006, v. 37, No. 5, p. 520-527